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德國默克試劑盒如何規(guī)避假陽性結(jié)果

更新時間:2014-12-26   點擊次數(shù):1636次
     德國默克試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。 由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設(shè)備,所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,德國默克試劑盒而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應(yīng)外,有時??梢姷揭恍╁e誤結(jié)果(即假陽性或假陰性)如標本的影響上海勁馬為大家解讀ELISA檢測的影響因素。
    溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),德國默克試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫,德國默克試劑盒它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍色,產(chǎn)生假陽性[。所以嚴重溶血標本禁用。
    標本受細菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,德國默克試劑盒被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果,標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,德國默克試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nèi)測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。
    制備德國默克試劑盒的方法步驟:
    1、抗原表位的計算機篩選;
    2、抗原的制備;
    3、血清的采集;
    4、間接ELISA方法的建立;
    5、間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;
    6、德國默克試劑盒的穩(wěn)定性驗證;
    7、對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒,德國默克試劑盒適用于大批量發(fā)病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預(yù)防、控制豬戊肝病毒的流行和阻斷戊肝病毒由豬向人傳播。
    塑料試管能吸附抗原物質(zhì),德國默克試劑盒樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。標本凝固不全。在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在德國默克試劑盒過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
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